使用說明書
【產(chǎn)品名稱】
Fast DNA Library Plus Prep Kit for MGI
【貨號(hào)/規(guī)格】
KM004-A(24 rxns);KM004-B(96 rxns);試用裝(6 rxns)
【產(chǎn)品簡(jiǎn)述】
本試劑盒針對(duì) MGI 高通量測(cè)序平臺(tái),提供了一管式便捷、通用的 DNA 文庫(kù)構(gòu)建方案,將片段化、末端補(bǔ)平和末端加 A 結(jié)合到一個(gè)步驟,大大縮短了建庫(kù)的時(shí)間、減少了繁瑣步驟造成的誤差,片段化和末端修復(fù)后的產(chǎn)物可直接進(jìn)行接頭連接,不需額外純化,后續(xù)操作和#KM001 Fast DNA Library Prep Kit for MGI操作相同。完整的文庫(kù)定量可將文庫(kù)稀釋至合適濃度,用雙鏈 DNA 熒光染料方法(如Thermo Qubit Flex Fluorometer)或 qPCR 絕對(duì)定量方法。
【樣本類型】
表 1 常用DNA推薦投入量
應(yīng)用 | 樣本類型 | 推薦投入量 |
全基因組測(cè)序 | 高質(zhì)量復(fù)雜基因組 | 50ng-1μg |
全外顯子靶向捕獲測(cè)序 | 高質(zhì)量復(fù)雜基因組 | 10ng-1μg |
全基因組靶向捕獲測(cè)序 | FFPE DNA | ≥50ng |
全基因組測(cè)序 | 微生物基因組 | 1ng-1μg |
推薦使用 TE 或超純水溶解 DNA 樣品,如樣品中含有 EDTA,則需磁珠純化或加入一定體積的 Neutralization Buffer 中和。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
所有試劑均應(yīng)保存于-20℃,Ligation Buffer 在低溫下會(huì)有晶體析出,屬正?,F(xiàn)象, 應(yīng)平衡至室溫后使用,產(chǎn)品有效期為 12 個(gè)月。
【組成成分】
組分 | 24 rxns | 96 rxns |
FEP Buffer | 120 μl | 480 μl |
FEP Enzyme Mix | 240 μl | 2×480 μl |
Fast DNA Ligase | 120 μl | 2×240 μl |
Fast Ligation Buffer | 600 μl | 4×600 μl |
2× HIFI Library PCR Master Mix | 600 μl | 4×600 μl |
Primer Mix for MGI * | 120 μl | 480 μl |
Neutralization Buffer | 120 μl | 480 μl |
*FEP Buffer 為片段化、末端修復(fù)的反應(yīng) buffer,FEP Enzyme Mix 為片段化、末端修復(fù)相關(guān)酶混合物。
*若有多個(gè)樣本,則推薦使用#KM002 和#KM003 接頭引物組合,本試劑盒提供一套引物,引物序列如下:
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
備注:分選磁珠推薦使用#NC1011 GDSPure DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。