RNase A

BR級(jí)，僅供研究使用

貨號(hào)：N9047

規(guī)格：1g

比活性：≥3000U/mg蛋白（≥60Kunitz單位/mg蛋白）。

形式：含有1 g RNase A，凍干粉末

產(chǎn)品說(shuō)明

RNase A是一種內(nèi)切核糖核酸酶，分子量為13.7 kDa（單體），可在C和U殘基位置特異性降解單鏈RNA。該酶可以切割核苷酸5’-核糖與鄰近嘧啶核苷3’-核糖上磷酸基團(tuán)之間的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生的2’, 3’-環(huán)磷酸可以水解成相應(yīng)的3’-核苷磷酸鹽。

RNase A推薦工作濃度1-100 μg/ml，因應(yīng)用類型的不同而異。該酶在多種反應(yīng)條件下均有活性。低鹽離子濃度時(shí)（0-100 mM NaCl），RNase A可以切割單鏈RNA、雙鏈RNA、以及RNA/DNA雜合子中的RNA；然而，當(dāng)NaCl濃度大于300 mM時(shí)，RNase A則特異性切割單鏈RNA。

應(yīng)用

——質(zhì)粒和基因組DNA的制備

——從重組蛋白制劑中去除RNA

——核糖核酸酶保護(hù)試驗(yàn)

——定位DNA或RNA中的單堿基突變

保存條件

4℃保存。在密封和干燥條件下儲(chǔ)存的保質(zhì)期為三年。RNase A粉末可在室溫下運(yùn)輸。

質(zhì)量控制

功能檢測(cè)方法為質(zhì)粒DNA提取過(guò)程中的RNA降解。

活性單位的定義

當(dāng)酵母RNA在37°C和pH 5.0下被水解時(shí)，一個(gè)單位的酶在260 nm處導(dǎo)致吸光度增加1.0。

50U大約相當(dāng)于1個(gè)Kunitz單位。

抑制和失活
-抑制劑：最有效的抑制劑是來(lái)自哺乳動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的~50 kDa蛋白，如核boLock?RNase抑制劑。
-其他抑制劑：尿苷2’,3’-環(huán)釩酸鹽、5’-二磷酸腺苷3’-磷酸鹽和5’-二磷酸腺苷2’-磷酸鹽(2)、SDS、焦碳酸二乙酯、4M胸氰酸胍加0.1M 2-巰基乙醇和重金屬離子。

-用苯酚/氯仿萃取法滅活。

-在95°C下加熱10分鐘后滅活。

本品僅供科學(xué)研究使用。