T4 RNA Ligase

貨號(hào)/規(guī)格：E1015-A/1,000 U 

濃度：10 U/μL

產(chǎn)品簡介 

T4 RNA 連接酶催化寡核苷酸、單鏈 RNA 和 DNA 分子間和分子內(nèi) 5'-磷酸基團(tuán)和 3'-羥基末端間磷酸二酯鍵的 ATP 依賴性形成。

最少底物：分子間反應(yīng)中為一個(gè)核苷 3',5'-磷酸氫鹽，分子內(nèi)反應(yīng)中為 8堿基寡核苷酸。

產(chǎn)品組成

儲(chǔ)存條件

保存于-20°C。

來源

重組 E. coli 菌株，含有從噬菌體 T4 克隆的基因 63。

單位定義

一個(gè)單位是指在37°C下30分鐘內(nèi)催化1nmol的5'-[³²P]-（A）_12-18轉(zhuǎn)化為抗磷酸酶形式所需酶的量。

在以下混合物中測(cè)定酶活性：50 mM Tris-HCl（pH 7.5），10 mM MgCl ₂,10 mM DTT，1 mM ATP，10 μM 5'-[32^P]-（A）_12-18（10 μM，5'-末端）。

適用范圍 

? RNA 3'-末端標(biāo)記（使用胞苷 3',5'-二[α-³²P]磷酸）

? RNA 與 RNA 連接

? 寡核糖核苷酸和寡脫氧核糖核苷酸的合成

? tRNA 特異性修飾

? 寡脫氧核苷酸連接至單鏈 cDNA 以實(shí)現(xiàn) 5' RACE（cDNA 末端快速擴(kuò)增）

? PCR 復(fù)合引物的位點(diǎn)特異性生成

抑制與失活

? 抑制劑：金屬螯合劑、SH基團(tuán)修飾試劑。

? 在70°C下加熱10分鐘。

本品僅供科學(xué)研究使用。