T4 DNA Ligase, HC

貨號(hào)/規(guī)格：E1014-D/5,000 Weiss U 

濃度：30 Weiss U/μL

產(chǎn)品簡(jiǎn)介 

T4 DNA Ligase催化雙鏈 DNA 或 RNA 中并列的 5'-磷酸和 3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。該酶可修復(fù)雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的單鏈缺口，將 DNA 片段與粘性末端或平末端連接結(jié)合，但對(duì)單鏈核酸無活性。

T4 DNA 連接酶需要 ATP 作為輔因子。

產(chǎn)品組成

儲(chǔ)存條件

保存于-20°C。

來源

重組 E. coli 菌株，含有從噬菌體 T4 克隆的基因 30。

單位定義

1個(gè) Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內(nèi)催化 1 nmol 的 [³²PPi] 轉(zhuǎn)化為可吸附形式所需的酶量。在以下混合物中測(cè)定酶活性：

66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl ₂、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [³²PPi]。1個(gè) Weiss 單位相當(dāng)于大約 200 個(gè)粘性末端連接單位（CEU）。1個(gè)CEU是指在特定條件下（即在16°C下30分鐘內(nèi)），將λ（lambda）DNA的HindIII片段連接達(dá)到50%所需的酶量。

適用范圍 

? 克隆限制性內(nèi)切酶生成的 DNA 片段

? 克隆 PCR 產(chǎn)物

? 將雙鏈寡核苷酸連接子或接頭與 DNA 相連

? 定點(diǎn)突變

? 擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性 (AFLP)

? 連接酶介導(dǎo)的 RNA 檢測(cè)

? 雙螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的缺口修復(fù)

? 線性 DNA 的自環(huán)化