產(chǎn)品簡(jiǎn)介
DSRed是一種靈敏、穩(wěn)定、安全無(wú)毒的核酸染色劑,適用于對(duì)瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠中的核酸(dsDNA、ssDNA、RNA)進(jìn)行染色。DSRed具有高于EB(溴化乙錠)的靈敏性,可以檢測(cè)到微量的DNA。DSRed通過(guò)靜電吸引的方式結(jié)合核酸分子,在工作濃度下不具有致突變能力,比EB更安全,更環(huán)保。
安全性說(shuō)明:本品具有特殊的分子結(jié)構(gòu),不能穿過(guò)細(xì)胞膜和乳膠手套。本品已通過(guò)生物安全性測(cè)試,在工作濃度下不具有致突變性,且對(duì)環(huán)境是安全的,可以直接傾倒入下水道。
保存條件
請(qǐng)置于室溫避光保存。本品結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,開(kāi)封后可至少保持十二個(gè)月有效。
使用方法
由于核酸分子結(jié)合染料后會(huì)影響自身在電泳過(guò)程中的遷移,同時(shí)會(huì)導(dǎo)致相鄰核酸條帶之間互相影響,因此更推薦使用后染法(泡染法)。對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠,也推薦使用后染法(泡染法)。
1. 凝膠預(yù)染法
1.1 按常規(guī)方法配制瓊脂糖凝膠;
1.2 向融化的瓊脂糖中加入適量的DSRed使其終濃度為1×,充分混勻。如50 ml瓊脂糖凝膠中加入5 μl 10,000× DSRed;
1.3 向制膠板中傾倒凝膠,使其凝固;
1.4 加樣,按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳;
1.5 通過(guò)凝膠成像系統(tǒng)(302 nm)觀(guān)察被染色的凝膠,拍照保存。
2. 后染法(泡染法)
2.1 按常規(guī)方法進(jìn)行電泳;
2.2 用純水將10,000× DSRed原液稀釋3,300倍至約3×。如50 ml純水中加入15 μl 10,000× DSRed;
備注:也可用0.1 M NaCl 稀釋10,000× DSRed至3×,可以增加染料靈敏性,但是重復(fù)使用易產(chǎn)生沉淀。
2.3 將電泳后的凝膠置于合適的容器中,如聚丙烯材質(zhì)的容器,再加入適量的3×染色液浸沒(méi)凝膠;
2.4 室溫輕輕振蕩染色約30分鐘;
備注:染色時(shí)間與凝膠厚度及瓊脂糖濃度有關(guān)。對(duì)于3.5%-10%的聚丙稀酰胺凝膠,通常需染色30分鐘至1小時(shí)。
2.5 用清水將染色的凝膠緩慢沖洗干凈;
2.6 通過(guò)凝膠成像系統(tǒng)(302 nm)觀(guān)察被染色的凝膠,拍照保存;
備注:染色液可以重復(fù)使用至少2-3次,置于室溫避光保存。
注意事項(xiàng)
1. DSRed是大分子核酸染料,難以穿透細(xì)胞膜,因而比小分子的溴化乙錠(EtBr,EB)更加安全,但是對(duì)DNA遷移的影響也更大。因此,為了避免DNA片段,尤其是多片段的DNA Marker產(chǎn)生條帶扭曲或分離異常等現(xiàn)象,我們更推薦建使用后染法來(lái)進(jìn)行染色。
2. DSRed在低溫環(huán)境下易發(fā)生沉淀,因此請(qǐng)置于室溫保存。若發(fā)生沉淀,可將染料加熱至45-50℃,2分鐘,振蕩溶解。
3.
由于DSRed具有較高的靈敏性,因此建議核酸樣品的上樣量為50-200 ng/泳道。若未知濃度的樣品亮度過(guò)高,請(qǐng)降低上樣量。
為了適應(yīng)預(yù)染法用戶(hù)的使用習(xí)慣,我們專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)了適用于大分子核酸染料的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)LD DNA Marker系列。因此,當(dāng)用戶(hù)使用DSRed等新型無(wú)毒核酸染料預(yù)染瓊脂糖凝膠時(shí),請(qǐng)搭配東盛生物LD DNA Marker系列。
如下圖所示,東盛生物經(jīng)典版DNA Marker DSTM 5000在DSRed預(yù)染的凝膠中條帶相互擠壓,不能有效分離,而LD DSTM 5000條帶可以正常分離。
相關(guān)產(chǎn)品
名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 適用核酸染料 |
LD DSTM 2000 | LM1101/LM1102 | 60次/300次 | DSRed等新型染料 |
LD DSTM 5000 | LM1111/LM1112 | 60次/300次 | |
DSTM 2000 | M1101/M1102 | 60次/300次 | EB,Goldview等 |
DSTM 5000 | M1111/M1112 | 60次/300次 |