HS? Taq DNA Polymerase

Cat. #：P1081，P1082，P1083，P1084

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

HS? Taq DNA Polymerase（高特異性Taq DNA聚合酶）是針對(duì)普通 Taq DNA聚合酶靈敏度高，易產(chǎn)生非特異性條帶的情況，專門研制的高特異性嗜熱DNA聚合酶產(chǎn)品。本產(chǎn)品的反應(yīng)緩沖液的離子種類和濃度都經(jīng)過(guò)改良，使得引物與模板的特異性結(jié)合力顯著增強(qiáng)，從而提高引物與模板結(jié)合的嚴(yán)謹(jǐn)性，減少非特異性擴(kuò)增。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明HS? Taq DNA Polymerase能顯著提高PCR擴(kuò)增的特異性，降低背景，又能對(duì)長(zhǎng)片段有較高的擴(kuò)增效率。延伸速度為1min/kb（70~75℃，簡(jiǎn)單模板可達(dá)10s/kb）。該酶具有5'→3'聚合酶活性，無(wú)3'→5'外切酶活性。擴(kuò)增產(chǎn)物具有3'-dA，可直接用于TA克隆。

產(chǎn)品應(yīng)用

常規(guī)PCR檢測(cè)，菌落PCR，genotyping，TA克隆，等

產(chǎn)品特點(diǎn)

高特異性，性能穩(wěn)定，粘性末端產(chǎn)物

產(chǎn)品組成

[1] HS? Taq DNA聚合酶分為2.5 U/μl與5 U/μl兩種包裝，可自由選擇，如沒(méi)特別說(shuō)明提供5 U/μl的包裝。

[2] 10× HS? PCR Buffer分為Mg²⁺ Plus與Mg²⁺ Free兩種包裝，可方便選擇。如無(wú)特別說(shuō)明提供Mg²⁺ Plus緩沖液。Mg²⁺ Free的10× HS? PCR Buffer提供25 mM MgCl₂。

[3] P1084不包含6× Loading Buffer，如有需要請(qǐng)單獨(dú)購(gòu)買（Cat. #：M9041）。

本產(chǎn)品不含dNTPs，如有需要請(qǐng)單獨(dú)購(gòu)買（Cat. #：P9011/P9012/P9013）。

活性定義

一個(gè)活性單位（U）指用活性化的大馬哈魚(yú)精子DNA作為模板/引物，在72℃、30 min內(nèi)，攝入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

保存條件

-20℃保存2年。

問(wèn)：如何利用HSTM Taq DNA聚合酶進(jìn)行加A反應(yīng)？

答：由高保真DNA 聚合酶（如Pfu）產(chǎn)生的PCR 擴(kuò)增片段的純化產(chǎn)物1-7μl；

    加入1μl HSTM Taq DNA 聚合酶10×反應(yīng)緩沖液（含MgCl2）；

    加入dATP 至終濃度0.2 mM；

    加入5 U的HSTM Taq DNA 聚合酶；

    加超純水至終反應(yīng)體積為10μl；

    70℃孵育15-30 分鐘；

    進(jìn)行TA克隆。